3D細(xì)胞培養(yǎng),也就是讓細(xì)胞在三維立體培養(yǎng)環(huán)境中生長(zhǎng),是近年來(lái)細(xì)胞培養(yǎng)的熱門方法:
因?yàn)槌R?guī)的2D培養(yǎng)是平面環(huán)境,與細(xì)胞在體內(nèi)的立體微環(huán)境存在一定差異,造成了2D培養(yǎng)在臨床前藥物有效性和毒性篩選中具有一定的局限性,嚴(yán)重依賴動(dòng)物模型。
隨著3D培養(yǎng)出現(xiàn),細(xì)胞培養(yǎng)模型更接近體內(nèi)生理環(huán)境,和動(dòng)物模型在藥物試驗(yàn)效果上具有很高的一致性,可減少對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的依賴,縮短研發(fā)周期,它勢(shì)必成為細(xì)胞培養(yǎng)的趨勢(shì)和潮流。
圖片來(lái)源:Fig.1doi: 10.1089/adt.2014.573
2D,3D培養(yǎng)機(jī)理差異
細(xì)胞吸附和伸展的程度2D培養(yǎng)中,細(xì)胞只在接觸面單側(cè)吸附,許多細(xì)胞逐步扁平化,有的分裂異常,有的喪失分化表型;3D培養(yǎng)中,細(xì)胞的整個(gè)表面都可吸附,建立起類似體內(nèi)的的細(xì)胞-基質(zhì)與細(xì)胞-細(xì)胞間相互作用。
細(xì)胞的極性極性對(duì)組織的結(jié)構(gòu)和活性分子的定向分泌很重要。像Transwell這種可通透支持物,是體外重建具有活體極性和分泌功能的上皮細(xì)胞3D模型的有用工具。
基因表達(dá)和mRNA剪切黑色素瘤細(xì)胞3D培養(yǎng)基因上調(diào)的模式和在體內(nèi)的腫瘤中一致;而2D培養(yǎng)時(shí)會(huì)展現(xiàn)出與上面不同的獨(dú)特基因表達(dá)模式。細(xì)胞培養(yǎng)方式還會(huì)影響到整合素mRNA的表達(dá)和蛋白的生物合成。
3D培養(yǎng)方案
3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì),首先根據(jù)有沒(méi)有支架分成兩大類,每類又有細(xì)分的技術(shù)和來(lái)源特點(diǎn):
目前應(yīng)用最廣的是天然基質(zhì)膠,來(lái)源于EHS小鼠肉瘤,它可以模擬體內(nèi)細(xì)胞其底膜的結(jié)構(gòu)、組成,具有類似的物理特性和功能??梢源龠M(jìn)細(xì)胞的粘附和分化,在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可以提高人腫瘤細(xì)胞在裸鼠上的生長(zhǎng)速度。
基質(zhì)膠被廣泛應(yīng)用于如下領(lǐng)域:
支持細(xì)胞生長(zhǎng)和分化
細(xì)胞粘附
血管新生
體外細(xì)胞遷移/侵襲
體內(nèi)成瘤
CultrexBME 產(chǎn)品線
R&D Systems擁有業(yè)界最好品質(zhì)的活性蛋白生長(zhǎng)因子,現(xiàn)在更為您帶來(lái)3D培養(yǎng)最佳基質(zhì)膠CultrexBME產(chǎn)品線,是您細(xì)胞培養(yǎng)的品質(zhì)之選。
通用型的Cultrex Original BME,廣泛應(yīng)用于2D,3D培養(yǎng),細(xì)胞粘附,細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn);
專為干細(xì)胞貼壁和維持設(shè)計(jì)的Cultrex Stem Cell Qualified BME;
3D培養(yǎng)的專用型Cultrex 3-D Culture Matrix BME;
異種移植或腫瘤移植的Cultrex BME Type 3;
對(duì)于組織化培養(yǎng)的不同需求,那些皮實(shí)的類器官類型,可以使用Cultrex Organoid Qualified BMEType 2;而較難培養(yǎng)的類型,我們有專門的Cultrex Organoid Qualified BMEType R1。
PathClear 3-D 產(chǎn)品線
PathClear產(chǎn)品線為您提供了更高規(guī)格的無(wú)病原控制:
內(nèi)毒素<8EU/mL
無(wú)細(xì)菌/真菌污染(依據(jù)美國(guó)藥典第24版,第71章,37℃培養(yǎng)14天進(jìn)行檢測(cè))
無(wú)支原體污染(PCR驗(yàn)證)
對(duì)包括LDEV在內(nèi)的總共31病原體/病毒檢測(cè),確保無(wú)污染
屬于PathClear產(chǎn)品線的3D培養(yǎng)產(chǎn)品如下:
其中type2型具有比基本型更高的抗拉強(qiáng)度,而生長(zhǎng)因子濃度方面,有正常濃度和低濃度兩款供選擇,后者適用于對(duì)基質(zhì)成分要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn),如信號(hào)通路和細(xì)胞因子研究等。
如此全面的產(chǎn)品線,必能滿足您的所需。
Cultrex應(yīng)用案例
案例一
2012年 5月Nature Protocol有一篇重要的介紹如何使用基質(zhì)膠促進(jìn)小鼠體內(nèi)更快成瘤的實(shí)驗(yàn)流程文章(doi:10.1038/nprot.2012.053),對(duì)Cultrex基質(zhì)膠出色的效果進(jìn)行了認(rèn)證:
Fig.1Rafael et al., Nature Protocol 2012
(a,c)用100μL 基質(zhì)膠混合2x105 PC3細(xì)胞,接種到SCID小鼠中9天后血管和腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)情況,(c)箭頭所指為CD31標(biāo)記的表皮細(xì)胞,顯示了腫瘤內(nèi)廣泛的血管形成。(b)為不加PC3細(xì)胞的對(duì)照。
Fig.2 Rafael et al., NatureProtocol 2012
在SCID小鼠乳房?jī)?nèi)脂肪墊中接種106MDA-MB-468后9天的腫瘤生長(zhǎng)對(duì)比。(a)為混合了低生長(zhǎng)因子無(wú)酚紅的基質(zhì)膠的實(shí)驗(yàn)組,(b)為不加基質(zhì)膠的對(duì)照組。基質(zhì)膠的存在不但加快了腫瘤生長(zhǎng),也促進(jìn)了血管形成。
案例二
案例三
總結(jié)
全面的產(chǎn)品線,多方驗(yàn)證的優(yōu)異品質(zhì),R&D Systems的Cultrex?BME基質(zhì)膠產(chǎn)品線必能滿足您的3D細(xì)胞培養(yǎng)所需,我們將以專業(yè)的產(chǎn)品和服務(wù)助力您的2D,3D細(xì)胞培養(yǎng),組織化培養(yǎng),干細(xì)胞維持和分化等實(shí)驗(yàn)。
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