多因子 ELISA 檢測(cè)試劑盒可實(shí)現(xiàn)多種分泌性蛋白（細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等）的同時(shí)檢測(cè)和定量，對(duì)于生物系統(tǒng)的綜合研究而言具有寶貴價(jià)值。多因子 ELISA 檢測(cè)試劑盒，不但具有更優(yōu)的效率、速度和檢測(cè)范圍。此外，采用多重檢測(cè)能降低每個(gè)靶標(biāo)結(jié)果的成本。博士德生物（Boster Biological Technology）與Quansys Biosciences合作，提供一系列Q-Plex?多因子ELISA檢測(cè)試劑盒。

原理

多因子檢測(cè)是一種基于96孔板夾心法酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)。涉及到特異性針對(duì)各標(biāo)志物的包被抗體和檢測(cè)抗體。把樣本和校準(zhǔn)品加入到包被了抗體的96孔板點(diǎn)陣中，這樣就能在96孔板中固定住它們的位置。洗去未結(jié)合的蛋白，加入特異性生物素標(biāo)記的多因子抗體混合物。

生物素標(biāo)記的抗體為每種特定排布的分析物完成了“夾心”。洗去未結(jié)合的生物素標(biāo)記的抗體后，加入辣根過氧化物酶，接著再洗滌一次。96孔板每孔中含有的辣根過氧化物酶的量與包被抗體捕獲的標(biāo)志物的量是成正比的。每孔中標(biāo)記酶的量是通過加入發(fā)光底物來測(cè)定的。

優(yōu)勢(shì)

• 節(jié)省時(shí)間：通常做ELISA檢測(cè)會(huì)耗費(fèi)您很多時(shí)間，尤其是當(dāng)您必須一次只能檢測(cè)一種標(biāo)志物時(shí)。博士德的多因子ELISA檢測(cè)試劑盒可以實(shí)現(xiàn)多種分泌性蛋白（細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等）的同時(shí)檢測(cè)和定量，能為您節(jié)省大量寶貴時(shí)間。

• 節(jié)省金錢：相比于常規(guī)的單靶標(biāo)ELISA檢測(cè)試劑盒，多因子 ELISA 檢測(cè)試劑盒節(jié)約了40%成本。

• 節(jié)省樣本：起始樣本量低，只需最少25ul樣品即可實(shí)現(xiàn)多因子檢測(cè)，對(duì)于小鼠樣本及其適用。傳統(tǒng)ELISA所需樣本量一般為100ul, 如果同時(shí)測(cè)定多種細(xì)胞因子，對(duì)于很多ELISA實(shí)驗(yàn)來說需要的樣本量就是一個(gè)關(guān)鍵問題。多因子檢測(cè)試劑盒只需要最少25ul的樣本即可完成檢測(cè)，為珍稀樣本的研究提供了更多數(shù)據(jù)。

• 節(jié)省試劑量：節(jié)省多達(dá)50%的試劑使用量。

• 同時(shí)檢測(cè)多個(gè)蛋白因子，檢測(cè)均一性，重復(fù)性高。

• 線性范圍廣：可檢測(cè)高達(dá)20,000pg/ml濃度因子，有效將所有樣本落在最佳線性范圍內(nèi)，得到準(zhǔn)確測(cè)定。

• 有同時(shí)檢測(cè)四種COVID-19相關(guān)蛋白的試劑盒。

數(shù)據(jù)分析

1.采集和分析大量數(shù)據(jù)Q-View?軟件是用于定量分析Q-Plex?系列測(cè)試和其他基于化學(xué)發(fā)光或基于IR實(shí)驗(yàn)的一款強(qiáng)大的工具。該軟件程序可獲取，查看和分析微孔板圖像。該軟件經(jīng)過優(yōu)化，可與Q-View?Imager Pro和Q-View?Imager LS一起使用，并且還可以與多種其他成像系統(tǒng)配合使用。

2.高質(zhì)量，可重復(fù)的化學(xué)發(fā)光成像Q-View?Imager Pro是一款高分辨率化學(xué)發(fā)光成像儀，用于微孔板和印跡，具有自動(dòng)化兼容性。其冷卻的高量子效率傳感器和臨床級(jí)光學(xué)器件與先進(jìn)的圖像采集算法配合使用，可以降噪并提高靈敏度。整套Q-View? Imager Pro設(shè)備可提供高靈敏度，高吞吐量數(shù)據(jù)，從而為您節(jié)省更多時(shí)間，樣品和金錢。

3.高質(zhì)量，低成本化學(xué)發(fā)光成像Q-View? Imager LS是一種高質(zhì)量，低成本的化學(xué)發(fā)光成像儀。Q-View? Imager LS支持基于96孔至384孔板的化學(xué)發(fā)光成像。

實(shí)驗(yàn)步驟

1.96孔板中進(jìn)行點(diǎn)包被

→ 自動(dòng)液體裝卸機(jī)在96孔板沒孔中打印20-50nL的點(diǎn)用來包被抗體

→ 孔中的每個(gè)點(diǎn)是一次單獨(dú)的測(cè)定

→ 低點(diǎn)間CV值

→ 點(diǎn)的尺寸是350-500um

→ 板上點(diǎn)的質(zhì)量是通過質(zhì)量控制的

2.測(cè)定

→ 加50ul樣本

→ 洗板

→ 加入特異性檢測(cè)抗體混合物

→ 洗板

→ 加入鏈酶親和素結(jié)合的HRP或IR-Dye

3.樣本的檢測(cè)

→ 添加底物后，會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)

→ 如果樣本中存在抗原，則斑點(diǎn)會(huì)發(fā)出信號(hào)，信號(hào)的強(qiáng)度是與樣品中抗原的量成正比的

→ 如果樣本中沒有抗原，則該斑點(diǎn)不發(fā)信號(hào)

 

4.成像

→ 孔板的圖像是通過Q-View? Imager Pro或Q-View? Imager LS系統(tǒng)內(nèi)的高分辨率相機(jī)拍攝的

→ 圖像文件（TIFF）導(dǎo)入Q-View? 軟件，一個(gè)Q-View? 項(xiàng)目被創(chuàng)建

5.圖像分析

→ 圖像在Q-View? 軟件打開

→ 圖像上可自動(dòng)發(fā)現(xiàn)斑點(diǎn)

→ 測(cè)定斑點(diǎn)反應(yīng)強(qiáng)度并生成原始數(shù)據(jù)

→ 用戶導(dǎo)入產(chǎn)品規(guī)格和孔板布局

 

6.數(shù)據(jù)分析

→ 分析原始數(shù)據(jù)并將其與板內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較

→ 運(yùn)用回歸模型計(jì)算未知濃度

→ 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線并導(dǎo)出樣本和統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)

產(chǎn)品目錄

1.Human Multiplex Kits

Human Angiogenesis (9-Plex)

Ang-2, FGF, HGF, IL-8, PDGF-BB, TIMP-1, TIMP-2, TNFα, VEGF

 

Human Chemokine (4-Plex)

IL-8, IP-10, MCP-1, Rantes

 

Human Cytokine – High Sensitivity (15-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-17, IL-23, IFN-γ, TNF-α, TNF-β

 

Human Cytokine – Inflammation (9-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IFNγ, TNFα

 

Human Cytokine – Screen (16-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-17, IL-23, IFNγ, TNFα, TNFβ

 

Human Cytokine – Stripwells (16-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-17, IL-23, IFNγ, TNFα, TNFβ

 

Human Cytokine Release Syndrome (16-Plex)

GM-CSF, IFNα, IFNγ, IL-1β, IL1RA, IL-2, IL-2RA, IL-6, IL-6r, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, MCP-1, MIP-1α, TNFα

 

Human Cytokine Panel 1 (6-Plex)

IL-1β, IL-6, TNFα, IFN-γ, IL-1α, IL-10

 

Human Cytokine Panel 2 (6-Plex)

IL-6, IL-8, TNFα, IFN-γ, IL-4, IL-10

 

Human Cytokine (4-Plex)

IL-6, TNFα, IFNγ, IL-10

 

Human Chemokine (9-Plex)

Eotaxin, GROa, I-309, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-2, RANTES, TARC

 

Human Female Hormone (8-Plex)

Adiponectin, Cortisol, C-Peptide, E1G, FSH, HCGb, IL-6, IL-10

 

Human Micronutrient (7-Plex)

AGP, CRP, Ferritin, sTfR, RBP4, Tg, HRP2

 

Human Malaria (5-Plex)

HRP2, LDH-Pan, LDH-Pv, LDH-Pf, CRP

 

Human MMP (6-Plex)

MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-7, MMP-9 and MMP-13

 

SARS-CoV-2 (4-plex) 

SARS-CoV-2 S1, SARS-CoV-2 S2, Sheep Fc (negative control), Anti-Human IgG (positive control)

 

2.Mouse Multiplex Kits

 

Mouse Cytokine Inflammation (14-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-17, MCP-1,TNFα, MIP-1α, GMCSF, RANTES

 

Mouse Cytokine Panel 1 (4-Plex)

MCP-1, MIP-1α, Rantes, TNFα

 

Mouse Cytokine Panel 2 (4-Plex)

IFNγ, IL-1β, IL-6, TNFα

 

Mouse Cytokine Panel 1 (6-Plex)

IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10, TNFα

 

Mouse Cytokine Panel 2 (6-Plex)

IL-1β, IL-10, MCP-1, MIP-1α, Rantes, TNFα

 

Mouse Cytokine – Screen (16-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-17, MCP-1, IFNγ, TNFα, MIP-1α, GMCSF, RANTES

 

Mouse Cytokine – Stripwells (16-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-17, MCP-1, IFNγ, TNFα, MIP-1α, GMCSF, RANTES

 

3.Rat & Porcine Multiplex Kits

 

Rat Cytokine – Inflammation (9-Plex)

IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12p70, IFN-γ, TNF-α

 

Porcine Cytokine – High Sensitivity (4-Plex)

IL-1β, IL-6, IL-8, TNFα